PEIpro^®作为新一代聚乙烯亚胺类转染试剂，已经基本取代了早期线性/支链型聚乙烯亚胺等同类产品，广泛应用于疫苗、CAR-T治疗以及基因治疗产品的研发和生产。由于该转染试剂有一定细胞毒性，且不易降解，因此，开发其专属分析方法有着十分重要的意义。但因知识产权、技术保护等因素， PEIpro^®的含量检测方法尚未见公开报道，其残留检测工作也只能依赖于少数欧洲公司。

为了解决该转染试剂的检测难题，更好地服务于本土医药企业，上海熙华药业有限公司联合岛津公司开发了PEIpro^®的专属检测方法。通过筛选大量色谱柱，我们发现Shim-pack Scepter-HD-C18（150*4.6mm，3μm）色谱柱适用于该转染试剂的检测。如图1所示，该色谱柱对PEIpro有非常好的保留，且峰型良好。

图1  PEIpro 0.5μg/ml加标溶液色谱图

1、峰面积的精密度（n=6）

取对照溶液重复6次进样，结果(见图2)表明本方法重现性和精密度良好。

图2 对照溶液6针叠图

2、检测灵敏度

如图3所示，通过推算，可以得知该方法的检测限和定量限约为0.003μg /mL和0.01μg /mL，可知方法具有极高的检测灵敏度。

图3  0.05和0.15μg/ml PEIpro对照溶液图谱

3、标准工作曲线

结果如图4所示，R²=1.00，拟合结果优异。

图4 浓度范围为0.05μg/ml-1.0μg/ml工作曲线

4、方法准确度

如图5所示，该方法的准确度优异，受生物样品的基质干扰较小。

图5  浓度为0.5μg/ml对照溶液及0.5μg/ml加标溶液对照图

5、总结

综上所述：本方法的准确度和精密度良好、工作曲线相关性优异、灵敏度高、抗干扰能力强，可以作为PEIpro^®残留检测的优选方法。